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ELISA试剂盒会出现的问题及解决办法

ELISA试剂盒产品会出现的问题及解决办法

1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。

  a.原因:未加入酶标记物。

  解决办法:请按照操作步骤进行。

  b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

  解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

  c.原因:室温太低。

  解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。

  d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。

  解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

  e.原因:试剂盒已过有效期限。

  解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

  2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。

  a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。

  解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

  b.原因:操作时间拖太久。

  解决办法:请在方法熟练后再进行操作。

  c.原因:微孔间相互污染。

  解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

  d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。

  解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。

  e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。

  解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。

  f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。

  解决办法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。

  3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)。

  a.原因:室温太高(>25℃)。

  解决办法: 若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。

  b.原因:底物溶液受到污染。

  解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。

  c.原因:反应时间超过太久。

  解决办法:请控制反应时间。

  d.原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。

  解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

  4. 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。

  a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。

  解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。

  b.原因:洗板过程发生问题(同2-f.)。

  解决办法:请参考2-f.

  c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。


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